【标题】

“自体富血小板血浆对人骨髓来源内皮祖细胞功能活性的影响*”一文的动态图片

【来源】

《中国组织工程研究与临床康复》杂志，2010年，第14卷，第14期，2607-2611

【作者】

赵忠海，李洪秋，阿  良，陈  宾，汪少伯

【单位】

沈阳医学院奉天医院骨科，辽宁省沈阳市  110024

【基金】

沈阳医学院课题(20063021)，课题名称：富血小板血浆对骨折修复及血管内皮影响的基础研究

【摘要】

背景：富血小板血浆是经过特殊方法提取的血小板含量丰富的血浆，相较普通血清含有更丰富的细胞因子，如血小板衍生因子、转化生长因子β、血管内皮生长因子等。

目的：观察富血小板血浆对人骨髓血来源的内皮祖细胞生物学特性的影响，拟探讨富血小板血浆在骨创伤修复血管化中的作用。

方法：抽取16名健康志愿者自体外周静脉血获取富血小板血浆。采用密度梯度离心法获取骨髓血内皮祖细胞，将培养8 d的内皮祖细胞随机分为对照组和富血小板血浆组，胎牛血清组采用培养基为体积分数为10%胎牛血清配比高糖DMEM培养基加青霉素、链霉素各100 U/mL；无血清对照组采用高糖DMEM培养基加青霉素、链霉素各100 U/mL。相差显微镜观察细胞生长情况，激光共聚焦显微镜鉴定，AC133和vWF双染阳性细胞为正在分化的内皮祖细胞，MTT法检测细胞培养6，12，48 h增殖情况，Transwell小室检测迁移，Matrigel管腔形成实验检测管腔形成能力。

结果与结论：①各组细胞均在接种后12~24 h开始贴壁，并由圆形逐步变化为梭型、多角形、不规则形状等。②富血小板血浆作用于内皮祖细胞6 h后，A490值明显高于对照组(P < 0.05)；12 h时其促进作用更强(P < 0.01)。在0~48 h，随时间延长，富血小板血浆促进内皮祖细胞增殖的作用相应增强。③富血小板血浆可提高内皮祖细胞的迁移能力，6 h开始明显增强(P < 0.05)，于12 h达高峰(P < 0.01)，48 h有所下降，但仍明显高于对照组(P < 0.01)。④富血小板血浆显著增强内皮祖细胞体外管腔形成能力，在作用时间为48 h最为显著，并且形成的管腔样结构也较对照组复杂

【关键词】

富血小板血浆；内皮祖细胞；增殖；分化；骨缺损

【JPG图片】

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图1  外周单个核细胞培养(×200)
图2  正在分化的内皮祖细胞(×100)
图3  PRP对内皮祖细胞管腔形成的影响(×100)

【全文】